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Vero細胞無血清培養(yǎng)的應(yīng)用

更新時間:2018-12-26  |  點擊率:1682

Vero細胞是現(xiàn)階段病毒疫苗生產(chǎn)的主要的細胞基質(zhì)。Vero細胞無血清培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用集中體現(xiàn)在病毒疫苗的開發(fā)研究和商業(yè)化生產(chǎn)中。Vero細胞無血清培養(yǎng)技術(shù)提高了病毒疫苗生產(chǎn)工藝的可靠性、產(chǎn)品質(zhì)量的可控性和安全性。目前,Vero細胞無血清培養(yǎng)已在包括狂犬病疫苗、流行性乙型腦炎疫苗、脊髓灰質(zhì)炎疫苗、流感疫苗、腎綜合征出血熱疫苗、甲型肝炎疫苗、呼腸病毒疫苗等的研發(fā)和生產(chǎn)中得到應(yīng)用。

 

 

狂犬病疫苗

  狂犬病疫苗是眾多Vero細胞生產(chǎn)的疫苗中商業(yè)化為成功的病毒疫苗。應(yīng)用Vero細胞無血清培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)的狂犬疫苗在免疫原性和安全性上均已得到充分的肯定。與含血清的合成培養(yǎng)基相比,商業(yè)化的Vero細胞無血清培養(yǎng)基更能滿足病毒生產(chǎn)階段細胞的營養(yǎng)需求。

流感疫苗

流感疫苗長期以來一直使用雞胚生產(chǎn),自Vero細胞被引人流感疫苗生產(chǎn)后,經(jīng)實驗證實幾乎所有在雞胚中測試的病毒株都能在Vero細胞中生長并達到高滴度。采用Vero細胞無血清培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)流感疫苗不僅能提高疫苗的產(chǎn)量和質(zhì)量,其重要性更在于能縮短疫苗生產(chǎn)周期、提高疫苗生產(chǎn)的計劃性,從而更有效地應(yīng)對流感的暴發(fā)。

脊髓灰質(zhì)炎疫苗

   國外很早就有1 000 L生物反應(yīng)器規(guī)模灌注培養(yǎng)Vero細胞生產(chǎn)脊髓灰質(zhì)炎疫苗的實例。目前,Vero細胞無血清培養(yǎng)生產(chǎn)脊髓灰質(zhì)炎疫苗仍處于研發(fā)階段。Cinatl等的研究結(jié)果表明,靜置培養(yǎng)下無血清培養(yǎng)基和含血清培養(yǎng)基中的Vero細胞生長和病毒生產(chǎn)無明顯差別,甚至無血清培養(yǎng)基中病毒的比生產(chǎn)率更高一些。

腸道病毒71疫苗

2008年伊始在我國安徽、北京等地暴發(fā)的手足口病是一種由腸道病毒71(EV71)感染引發(fā)的嚴重的兒童神經(jīng)系統(tǒng)疾病。由于目前尚無針對該病毒的有效抗病毒劑,開發(fā)有效的疫苗成為控制由EV71感染引發(fā)的手足口病的有效措施。

 

病毒性疫苗生產(chǎn)所使用的細胞培養(yǎng)基大多為M199、MEM或DMEM合成培養(yǎng)基,添加一定比例的滅能新生牛血清來進行。生產(chǎn)的過程是按 GMP的要求進行檢查評定的,細胞培養(yǎng)基更換批號或更換廠家,血清批次間的差異經(jīng)常出現(xiàn)影響細胞生長的情況。

 

締一生物為您推薦一款可用于Vero細胞培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基,由HiMedia公司生產(chǎn)的SFRE 199-1和SFRE 199-2,是在動物細胞培養(yǎng)基M199的基礎(chǔ)上研發(fā)出來的。

 

其主要區(qū)別是SFRE-199-1和SFRE-199-2將M199標(biāo)準(zhǔn)配方中的精氨酸增加到150mg/L,半胱氨酸增至4mg/L,胱氨酸增至40mg/L,谷氨酰胺增至300mg/L,谷氨酸增至75mg/L,甘氨酸增至100mg/l,組氨酸增至40mg/L,酪氨酸增至80mg/L,以獲得較大的細胞生長而未表現(xiàn)出毒性。與加胎牛血清的常規(guī)培養(yǎng)基比較,細胞生長速率、產(chǎn)量和蛋白容量均相同。均在移植后第6天單層細胞達到充分融合。

 

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